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首页 > 供应产品 > 供应Invitrogen公司trizol
供应Invitrogen公司trizol
浏览: 777
品牌: Invitrogen
产品规格: 100ml
单价: 1250.00元/瓶装
最小起订量: 1 瓶装
供货总量: 20 瓶装
发货期限: 自买家付款之日起 1 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2021-06-14 13:51
 
详细信息
  TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制RNA酶活 性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase(RNA酶)。

使用方法:

    该法从细菌中提取RNA——用匀浆器将组织磨碎,加入TRIzol处理组织。5分钟后加入氯仿,以每分钟12000转离心5分钟,样品即分成水样层、中间层和层。

    ※RNA存在于水样层中,收集水样层后可以通过异丙醇沉淀RNA来还原。

    ※在除去水样层后,层中的DNA和蛋白质也能相继以沉淀的方式还原:乙醇能使中间层的DNA沉淀析出,在层中加入异丙醇能沉淀出蛋白质。

    每100ml TRIzol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。无论样品是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织 (50-100mg)和细胞(约五百万个)及大量的组织(≥1g)和细胞(超过一千万个)均有较好的分离效果。

    每一百万细胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA,每毫克组织用TRIzol抽提可得1-10微克RNA(产量因细胞和组织不同而异)。

    TRIzol操作上的简便性允许其同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。

    TRIzol抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白质的污染,故而能够作RNA 印迹分析、斑点杂交、poly(A)+ 选择、体外翻译、RNA酶保护分析和单分子克隆(PCR)。

    ※如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用级联扩大的DNase I(Cat. No. 18068)来处理抽提的总RNA。

    ※TRIzol试剂能促进不同种属、不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA经过琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于 7kb和15kb之间的不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体RNA条带位于~5 kb (28S)和~2 kb (18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之间 (tRNA,5S)。当抽提的RNA用TE稀释时,其A260/A280比值≥1.8。抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。

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